-
細胞傷口愈合
發布時間： 2023-01-16 點擊次數： 1463次原理
在單層培養細胞間制作劃痕以產生愈傷區域，然后監控該傷口周圍細胞的向劃痕遷移的現象，即傷口愈合。改變細胞遷移和/或生長的因素可以增加或降低傷口愈合率。該方法可以定量，適用于自動化系統高通量篩選。材料與儀器
人MDA-MB-231細胞
DMEM培養基 胎牛血清 PBS 戊二醛 乙醇 結晶紫
24孔培養板 槍頭 細胞培養儀步驟
1.細胞在含有10%FBS的DMEM培養基中生長。
2.細胞以一定密度接種到24孔細胞培養板中，生長24小時后，單層細胞融合度應達到70-80%。
3.不要更換培養基。用新的1ml槍頭輕輕的在單層培養細胞間劃痕，劃痕橫穿過孔，槍頭盡量與板孔的底部垂直，不要傾斜。這樣產生的gap的距離才與槍頭末端的外直徑相等。Gap的距離可以選用不同型號的槍頭調節。劃痕在同一方向成一條直線。
4.在垂直與第一條劃痕的方向制作另一條劃痕，每孔劃痕成十字交叉型。
5.劃痕后，用培養基輕輕的清洗板孔2次，以去除脫落細胞。
6.每孔添加新鮮培養基。
7.（培養基中含有某些成分，如抑制/促進細胞遷移和/或增殖的化學物質）
8.細胞生長48小時（或根據時間需要）。
9. 1xPBS清洗細胞兩次，然后使用3.7%多聚甲醛固定30分鐘。
10. 1%的結晶紫（2%乙醇溶解）染色30分鐘。
注意事項
為了降低實驗結果的可變性，建議每孔選擇多個視野觀察，每組做多個重復。常見問題
gap的距離可通過Photoshop或ImagJ軟件測量，為了降低實驗結果的可變性，建議每孔選擇多個視野觀察，每組做多個重復。
以上就是本期的內容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網站鏈接了解更多技術與產品資訊。
安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規模生物生產、基因和細胞治療領域客戶，提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產，包括培養間充質干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養規模生產服務；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質膠產品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫藥領域提供優質的產品和技術服務，努力發展為基因治療、細胞治療的生物科技企業。
- 下一篇：葉綠體被膜完整性的測定
- 上一篇：一氧化氮合酶免疫組化顯示實驗
銷售熱線
