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            斑點濾膜結合法

            發布時間: 2022-03-14  點擊次數: 1325次


            原理


            材料與儀器


            待測蛋白質樣品
            10%三氯醋酸(TCA) 考馬斯亮藍凝膠染色液 考馬斯亮藍凝膠脫色液
            Whatman 3 MM 濾紙


            步驟



            1. 用鉛筆在 3 mm 濾紙上畫出 1 cm x 1 cm 大小的方格;


            2. 在每一方格中心加入 3 ul 樣品;


            3. 將濾紙涼干,大約需要 15 min;


            4. 將濾紙浸入 10% TCA 溶液中 30 s(TCA 溶液可重復使用);


            5. 用水快速漂洗濾紙;


            6. 將濾紙浸入考馬斯亮藍凝膠染液中 30 s(染液可重復使用);


            7. 用水快速漂洗濾紙;


            8. 在考馬斯亮藍凝膠脫色液中使濾紙脫色,脫色在幾分鐘之內完成;


            9. 通過相應顯藍色的方格,可判斷其含有一定量的蛋白質存在。



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